Indholdsfortegnelse:

Hvordan indsætter man et gen i et plasmid?
Hvordan indsætter man et gen i et plasmid?

Video: Hvordan indsætter man et gen i et plasmid?

Video: Hvordan indsætter man et gen i et plasmid?
Video: DNA cloning and recombinant DNA | Biomolecules | MCAT | Khan Academy 2024, November
Anonim

De grundlæggende trin er:

  1. Skær op plasmid og "indsæt" i gen . Denne proces er afhængig af restriktionsenzymer (som skærer DNA) og DNA-ligase (som forbinder DNA).
  2. Indsæt det plasmid ind bakterie.
  3. Vokse op en masse plasmid -bærer bakterier og bruger dem som "fabrikker" til at lave proteinet.

Hvordan kan et gen også indsættes i et plasmid GCSE?

det er indsat i et plasmid ved hjælp af ligase enzymer. det plasmid går ind i en bakteriecelle. den transgene bakterie formerer sig, hvilket resulterer i i millioner af identiske bakterier, der producerer human insulin.

Derudover, hvordan subkloner du et gen? Grundlæggende trin til Subkloning Du frigiver og oprenser dit insert fra forældrevektoren, ligerer dette insert til en forberedt destinationsvektor, transformerer denne ligeringsreaktion til kompetente bakterieceller. Derefter screener du de transformerede celler for indsættelsen.

Når man tager dette i betragtning, hvad er de 4 trin i genkloning?

I de klassiske restriktionsenzymfordøjelses- og ligeringskloningsprotokoller involverer kloning af ethvert DNA-fragment i det væsentlige fire trin:

  • isolering af DNA'et af interesse (eller mål-DNA),
  • ligering,
  • transfektion (eller transformation), og.
  • en screenings-/udvælgelsesprocedure.

Hvordan amplificerer man et plasmid?

Eksperimentel procedure

  1. Kør PCR og oprens PCR-produktet: Kør PCR for at amplificere dit insert-DNA.
  2. Fordøj dit DNA:
  3. Isoler din indsats og vektor ved gelrensning:
  4. Ligate din indsats ind i din vektor:
  5. Transformation:
  6. Isoler det færdige plasmid:
  7. Bekræft dit plasmid ved at sekventere:

Anbefalede: