Hvorfor ville et restriktionsenzym ikke skære?
Hvorfor ville et restriktionsenzym ikke skære?

Video: Hvorfor ville et restriktionsenzym ikke skære?

Video: Hvorfor ville et restriktionsenzym ikke skære?
Video: Restriktionsenzyme - Definition: Abiturvorbereitung Biologie 2024, November
Anonim

Der kan være flere forskellige årsager til, at din restriktionsenzym skærer ikke DNA'et som gennemgået i denne video. Fremstilling af DNA, der skal spaltes bør være fri for forurenende stoffer som phenol, chloroform, alkohol, EDTA, rengøringsmidler eller overskydende salte, som alle kan forstyrre restriktionsenzym aktivitet.

I denne forbindelse, hvorfor skærer restriktionsenzymer ikke bakterielt DNA?

Bakterie har restriktionsenzymer , også kaldet restriktionsendonukleaser , hvilken skære dobbeltstrenget DNA på bestemte punkter ind i fragmenter. Interessant nok, restriktionsenzymer ikke kløve deres egne DNA . Bakterie forhindre deres egne DNA fra hugge ned af restriktionsenzym gennem methylering af begrænsning websteder.

Man kan også spørge, hvor skærer restriktionsenzymer? Restriktionsenzym Typer Generelt Type I enzymer skæres DNA på steder fjernt fra genkendelsessekvensen; Type II skære DNA inden for eller tæt på genkendelsessekvensen; Type III skære DNA nær genkendelsessekvenser; og Type IV spalter methyleret DNA.

På samme måde bliver det spurgt, hvad der sker, hvis man tilsætter for meget restriktionsenzym?

Ufuldstændig fordøjelse kan forekomme når for meget eller også lille enzym anvendes. Det tilstedeværelse af forurenende stoffer i det DNA-prøve kan inhibere enzymerne , hvilket også resulterer i ufuldstændig fordøjelse. Nogle restriktionsenzymer kræver cofaktorer for fuld aktivitet.

Hvorfor virker min restriktionsoversigt ikke?

Ufuldstændig eller ej fordøjelse på grund af enzymaktivitet blokeret af DNA-methylering. Hvis dit enzym er aktivt og fordøjer kontrol DNA og det reaktion er sat op under optimale forhold, men du kan stadig se problemer med fordøjelse , det kan være fordi det enzym hæmmes ved methylering af det skabelon DNA.

Anbefalede: