Indholdsfortegnelse:

Hvordan vælger du kloner?
Hvordan vælger du kloner?

Video: Hvordan vælger du kloner?

Video: Hvordan vælger du kloner?
Video: klon seryali 1 bolum Azərbaycan dilində 2024, November
Anonim

Hvornår at vælge -en klon , vær sikker på, at rødderne er stærke, hvide og ivrigt stikker ud fra vækstmediet. Hvis rødderne er brune og skrumpede, eller på anden måde virker inaktive, skal du sætte dem tilbage og se efter en bedre.

Desuden, hvordan kloner man en enkelt celle?

  1. Tæl cellerne for at sætte ~16.000 celler i den første brønd (A1) på en 96-brønds plade indeholdende 200 µL medium.
  2. Fjern 100 µL fra A1-holdige celler og bland med B1, pipetter op og ned 3x for at blande godt, før du fjerner 100 µL og blander med C1 osv.

Og hvordan vælger man en pattedyrcellekoloni? Placer pladen under mikroskopet for at vælge udifferentieret sund kolonier . Vælg kolonier ved hjælp af en P-20 pipette indstillet til 10 ul. Forsigtigt plukke -en koloni uden at bryde op koloni til single celler , og overfør det til en 96-brønds plade med trypsin. Pipetter op og ned et par gange for at sprede koloni.

Hvordan bruger man tilsvarende en kloncylinder?

Ved brug af steril medium pincet, tag en kloningscylinder . Tryk forsigtigt på den flade bund af cylinder ind i det glatte silikonefedt og fjern med en pludselig lodret bevægelse. Hvis det gøres korrekt, vil dette give en jævn fordeling af fedt på bunden af cylinder . Indstil cylinder over en koloni.

Hvordan vælger man kolonier til stabile cellelinjer?

Protokollen til generering af stabile cellelinjer kræver flere trin som vist nedenfor:

  1. Generer en dræbskurve for at bestemme den optimale udvælgelsesantibiotikumkoncentration.
  2. Transficer celler med ønsket plasmidkonstruktion(er)
  3. Vælg og udvid stabile polyklonale kolonier.
  4. Identificer enkelte kloner ved begrænset fortynding og ekspansion.

Anbefalede: