Hvordan fungerer Sanger DNA-sekventering?
Hvordan fungerer Sanger DNA-sekventering?

Video: Hvordan fungerer Sanger DNA-sekventering?

Video: Hvordan fungerer Sanger DNA-sekventering?
Video: Секвенирование по Сэнгеру 2024, November
Anonim

Sanger-sekventering resulterer i dannelsen af forlængelsesprodukter af forskellige længder, der afsluttes med dideoxynukleotider i 3'-enden. Forlængelsesprodukterne adskilles derefter med kapillærelektroforese eller CE. Molekylerne injiceres med en elektrisk strøm i et langt glas kapillært fyldt med en gelpolymer.

På denne måde, hvad er Sanger-metoden til DNA-sekventering?

Sanger-sekventering , også kendt som kædetermineringen metode , er en teknik til DNA -sekventering baseret på den selektive inkorporering af kædeterminerende dideoxynukleotider (ddNTP'er) af DNA polymerase under in vitro DNA replikation. Det blev udviklet af Frederick Sanger og kolleger i 1977.

Også, hvordan fungerer kædetermineringssekventering? Sanger DNA sekventering er også kendt som kæde - afslutning metode til sekventering . ddNTP'er resulterer i afslutning af DNA-strengen, fordi ddNTP'er mangler 3'-OH-gruppen, der kræves til dannelse af phosphodiesterbinding mellem nukleotider. Uden denne binding er kæde af nukleotider, der dannes, er afsluttet.

Simpelthen så, hvorfor laver vi Sanger -sekventering?

Sanger-sekventering er -en metode af DNA -sekventering baseret på selektiv inkorporering af kædeterminerende dideoxynukleotider ved DNA polymerase under in vitro DNA replikation. Det har stadig fordelen i forhold til kortlæsning sekventering teknologier (som Illumina), at det kan fremstille DNA-sekvens læser på > 500 nukleotider.

Er Sanger-sekventering nøjagtig?

Sanger-sekventering med 99,99 % nøjagtighed er "guldstandarden" for klinisk forskning sekventering . Nyere NGS -teknologier bliver imidlertid også almindelige i kliniske forskningslaboratorier på grund af deres højere kapacitet og lavere omkostninger pr. Prøve.

Anbefalede: