Hvordan virker Gibson-kloning?
Hvordan virker Gibson-kloning?

Video: Hvordan virker Gibson-kloning?

Video: Hvordan virker Gibson-kloning?
Video: Genteknik del 2 2024, November
Anonim

Det Gibson kloning Master Mix består af tre forskellige enzymer i en enkelt buffer. Hvert enzym har en specifik og unik funktion for reaktionen: T5 Exonuclease - skaber enkeltstrenget DNA 3'-udhæng ved at tygge tilbage fra DNA 5'-enden. Komplementære DNA-fragmenter kan efterfølgende anneale til hinanden.

I betragtning af dette, hvordan virker Gibson?

Det Gibson Assembly®-metoden er en kloningsprocedure, der tillader kloning af to eller flere fragmenter uden behov for restriktionsenzymfordøjelse eller kompatible restriktionssteder. I stedet er brugerdefinerede overlappende ender inkorporeret i fragmenterne for at tillade sømløs sammenføjning af tilstødende fragmenter.

På samme måde, hvad er der i Gibson Assembly Master Mix? Det Gibson Cloning Master Mix består af tre forskellige enzymer i en enkelt buffer. Hvert enzym har en specifik og unik funktion for reaktionen: T5 Exonuclease - skaber enkeltstrenget DNA 3'-udhæng ved at tygge tilbage fra DNA 5'-enden. Komplementære DNA-fragmenter kan efterfølgende anneale til hinanden.

Hvordan fungerer Golden Gate montage på denne måde?

gylden port kloning el Golden Gate forsamling er en molekylær kloningsmetode, der giver en forsker mulighed for samtidig og retningsbestemt at samle flere DNA-fragmenter til et enkelt stykke ved hjælp af Type IIs restriktionsenzymer og T4 DNA-ligase. Det her samling er udført in vitro.

Hvordan fungerer Gateway-kloning?

Det GATEWAY Kloning Teknologien er baseret på det stedspecifikke rekombinationssystem, som anvendes af fag l til at integrere dets DNA i E. AttL- og attR-stederne, der omgiver det indsatte fag-DNA, rekombinerer stedspecifikt under udskæringshændelsen for at reformere attP-stedet i fag l og attB-sted i E.

Anbefalede: